饲料脂肪是鱼类能量需求的重要来源。近年来，由于油脂价格不断攀升，如何提高饲料脂肪的利用率，减少油脂添加量，减少高油脂带来的危害如油脂氧化、脂肪肝等问题，成为人们关注的焦点。随着饲料工业的不断发展, 饲用酶制剂越来越受到重视, 它已作为饲料添加剂广泛应用于饲料中。

添加外源脂肪酶能促进脂肪的消化。Dierick等在动物油脂脂肪源的猪日粮中添加0． 05%,微生物源脂肪酶显著提高了低链脂肪酸( 如C6 ∶ 0，C14 ∶ 0) 、干物质、粗蛋白、粗灰分和消化能的表观消化率( P ＜ 0． 05) 。饲料中添加0． 05%微生物源脂肪酶后，仔猪前肠内容物的中链脂肪酸、游离脂肪酸含量分别比对照组提高104%、116% ( P ＜ 0． 01)。Tan 等在含全脂米糠、高油玉米、干苜蓿粉、血粉、饼粕等的肉鸡饲料中添加0． 1% 外源脂肪酶，表观消化能提高5% ～11%，增重速度提高4% ～ 10%，饲料利用率提高2% ～ 7%。但在Polin 等实验中，在含4% 动物油的玉米基础日粮中添加0． 1% 猪胰脂肪酶粗提物，对白来航公鸡的脂肪消化率并无显著提高。另外，饲料中加入脂肪酶在一定程度上也能促进生长。在畜禽上，Dierick报道在猪日粮中

罗非鱼(Tilapia )具有繁殖力强、生长速度快、耐粗食、抗病力强等优点, 是当前淡水养殖业的重要养殖品种之一。其肉质精美，无肌间刺，价格适中，深受各地区消费者欢迎. 近年来，中国罗非鱼产品出口贸易发展迅速，出口总额从2002年的0.22亿美元增长到2012年的11.63亿美元，是我国出口量最大的养殖鱼类。有关该种鱼的生物学, 繁殖学, 生理学,组织学, 能量学和营养学方面有较多报道, 但有关添加剂在罗非鱼饲料中的应用研究较少, 对脂肪酶的研究也未见于报道中。

鱼类消化酶的活性不但因不同食性,不同生长阶段而有所差异.生活在不同温度,盐度等环境条件下以及投喂饲料等外部刺激能引起鱼类消化酶活性的改变.鱼类消化酶活性还存在着昼夜变化.饲料中添加活性物质能提高鱼类消化酶的活性,因此,我们可以用鱼类消化酶的研究结果来指导鱼类的养殖过程,我们可以根据鱼类消化酶活性的大小来调节其饲料的营养配比,以提高鱼类对饲料的消化能力,提高饲料转化率,为了使养殖鱼类达到最佳生长速度,我们在建立鱼类最适生长环境条件时,可以把鱼类消化酶活性最高的环境条件作为参考数据.

现有研究结果表明，外源脂肪酶对脂肪代谢的影响和作用机制可能是多途径的。幼鱼消化系统不完善，胆汁、脂肪酶分泌不足而且肠道比较短导致对脂肪的吸收率较低。体外试验表明，低剂量的胃蛋白酶不影响猪源性脂肪酶和微生物源性脂肪酶的活。外源酶来源于微生物或植物，与体内消化酶的结构和最佳作用条件不一致，因此不存在反馈性抑制，可能还具有协同作用。因此添加外源脂肪酶能补充内源脂肪酶的不足，增强酶的活性，还有可能对内源消化酶的分泌还有一定的促进作用，因而有利于鱼类营养成分的消化分解和吸收利用。也有研究认为适量添加脂肪酶能部分释放中链脂肪酸，这些中链脂肪酸能抑制肠道有害微生物，改善肠道菌落环境，从而促进消化，起到类似抗生素的作用。由此推测，脂肪和脂肪酶的合理组合可能代替抗生素的使用.

脂肪营养的主要功能是提供能量和必需脂肪酸，饲料脂肪水平过高或过低都对罗非鱼生长不利。脂肪酶按其来源主要分为3 类: ( 1) 动物源性脂肪酶，如猪、牛等胰脂肪酶提取物。( 2)植物源脂肪酶，如蓖麻籽、油菜等。( 3) 微生物源性脂肪酶，如真菌、细菌。其中由于微生物源性脂肪酶适应性广、容易大规模生产而被广泛研究和应用。脂肪酶在饲料工业的上的应用主要是在两方面: 一方面作为脂类消化促进添加剂与胆汁酸、胆汁酸盐和多种乳化剂共同促进脂肪消化; 另一方面与蛋白酶、淀粉酶等其它酶相互组合配伍形成复合酶制剂。在畜禽动物的研究表明，饲料中添加脂肪酶，可提高饲料中油脂的消化吸收率，促进动物的生长，缓减仔猪断奶营养应激.当前罗非鱼养殖业迅速发展，为此，本试验以期解决罗非鱼饲料中脂肪酶含量最适量的问题,并将其应用于实际养殖中。通过在饲料中添加适量的脂肪可改善饲料的适口性，使鱼体生长率和饲料利用效率提高。

脂肪酶功能是将脂肪水解为甘油一酯、甘油二酯和游离脂肪酸。是动物体内的一种重要消化酶。脂肪酶在饲料工业的上的应用主要是在两方面: 一方面作为脂类消化促进添加剂与胆汁酸、胆汁酸盐和多种乳化剂共同促进脂肪消化; 另一方面与蛋白酶、淀粉酶等其它酶相互组合配伍形成复合酶制剂。在饲料中添加脂肪酶可以减少油脂的添加量、降低饲料成本, 而且还可以补充内源酶的不足添加0.2 g/kg的脂肪酶可提高鳗的日增重率28.53% ～ 71.38%, 显著降低饲料系数14.69% ～ 20.98%这些研究表明，脂肪酶应用于鱼类可以改善对脂肪的利用。但是相对于蛋白酶、淀粉酶等其他酶来说，脂肪酶的多样性、稳定性较差、底物不溶于水、提纯困难以及生产成本较高等特殊性增加了对其进行研究的难度，导致了对于脂肪酶的理论研究和应用研究的投入较其他酶类滞后。为此，本试验以罗非鱼为研究对象，在饲料中添加脂肪酶，考察对罗非鱼的生长及血清生化指标的影响，探索最适添加量，为脂肪酶在淡水鱼饲料中的合理应用提供理论依据.

本试验采用单因素梯度法，以初始体重12g左右罗非鱼为研究对象。实验共分5组，以基础饲料为对照组。在基础组饲料上分别添加不同用量的的脂肪酶酶制剂。经过20 d 暂养之后进入正式试验，挑选体格健壮、规格一致400 mg / kg的鱼种,随机分为4 组饲以不同的5种饲料，每组设3 个重复，每个重复20尾鱼。按试验鱼体重3% ～ 5% 投饲，每天投喂2 次，分别为9: 00 和17: 00。经正式试验60d 饲养后，测定生长性能（包括增重率、存活率、特定生长率。饵料系数等相关指标），同时从每个平行组中随机取出10尾鱼，采用尾静脉取血，离心( 3 000 r /min，10 min)，取上层血清置于－ 20 ℃冰箱冷冻保存备用。使用测定生化指标试剂盒及血脂临床试剂和UV － 752 型紫外可见分光光度计、血液生化分析仪测定各项生化指标，每组各项指标均测定3 个重复。具体指标内容和方法包括: 血清低密度脂蛋白( LDLC) : 选择性沉淀法; 血清高密度脂蛋白( HDLC) : 选择性沉淀法; 甘油三酯( TG) : 酶法; 总胆固醇( TC) : 酶法;

饲养结束后． 测定各组瓦氏黄颡鱼的体重。并计算特殊生长率、成活率、增重率以及饲料系数等。

S1 =［ln( WF ) － ln( WI) ］× 100 / t ( 1)

F = R / ( WF + WD － WI ) ( 2)

Wr = ( WF － WI ) × 100 /WI( 3)

P = ( WF － WI ) / ( R × A) ( 4)

S2 = NF × 100 /NI ( 5)

WL = W1 × 100 /W0 ( 6)

WV = W2 × 100 /W0 ( 7)

WI = W3 × 100 /W0 ( 8)

式中: S1 为特殊生长率( % / d) ; F 为饲料系数( % ) ; Wr 为增重率( % ) ; P 为蛋白质效率( % ) ;S2 为存活率( % ) ; WL 为肝体比指数( % ) ; WV 为内脏比指数( % ) ; WI 为脂体比指数; WI 为初均重( g) ; WF 为末均重( g) ; WD 为死亡鱼均重( g) ; t为试验天数( d) ; R 为摄食量; A 为饲料中粗蛋白的含量( % ) ; NI 为实验开始时放鱼尾数; NF 为实验结束时鱼尾数; W1 为肝脏重( g) ; W2 为内脏重( g) ; W3 为肠脂重( g) ; W0 为全鱼体重( g) 。

所有数据采用SPSS 17.0 统计软件对各组试验鱼生理和生化数据进行单因素方差分析，用Duncan 氏法进行多重比较，显著性水平P 采用0.05。试验数据用平均数± 标准差表示。

本人通过专业课程的学习，对鱼类养殖有了基本了解。通过查阅相关文献目前已对本项目的立意、研究内容等理解透彻，同时已熟悉酶制剂在饲料中应用等相关研究方法。指导老师长期致力于酶制剂在水产饲料中应用研究，具有丰富的理论与实践经验。同时上海海洋大学水产与生命学院已具备本实验中所用的全部仪器和实验养殖条件，此外指导老师所在的生理学生物适应性实验室也为本实验的顺利提供了有力的保障。

此项目目的是从生长性能及血液生化指标等方面综合评价脂肪酶在罗非鱼饲料中应用的可行性，确定脂肪酶在罗非鱼饲料中的适宜添加量。为探寻脂肪酶作用机制及可能途径提供新的研究思路，同时为实际应用提供理论参考。

本实验运用传统营养学研究方法，结合鱼类消化代谢原理，利用单因素梯度法研究脂肪酶对罗非鱼生长及血液生化指标的影响。探究脂肪酶在罗非鱼饲料中应用的可行性，明确脂肪酶在罗非鱼饲料中的宜适添加量，以期提高油脂的消化利用率、减少油脂的添加量、降低饲料成本,补充内源酶的不足.为进一步研究分析外源脂肪酶对脂肪代谢的影响和作用机制，扩大脂肪酶在淡水鱼类饲料中的应用提供相应研究资料。